încărcare ...
RO
Cum să interpretăm corect rezultatele testelor pentru COVID-19

Cum să interpretăm corect rezultatele testelor pentru COVID-19

17.05.2020
Epidemia actuală a provocat un interes deosebit pentru  oamenii de știință, medici și pacienți înșiși în cercetarea de laborator infecții noi. Din motive evidente, majoritatea întrebărilor sunt adresate specialiștilor în medicină de laborator,dintre care cele mai importante sunt - precizia și fiabilitatea, interpretarea și valoarea prognostică a testelor pentru COVID-19.

Datorită numărului mare de astfel de solicitări din partea medicilor, Alfa Diagnostica, pe baza unei analize a datelor din lumea actuală, și-a prezentat propria revizuire sub formă de întrebări și răspunsuri, și anume: cum să utilizați și să interpretați corect rezultatele testelor pentru diagnosticul de COVID-19.

COVID-19
  • COronaVIrus Disease sau boala, cauzată de coronavirus SARS-CoV-2.
Ce teste sunt folosite pentru stabilirea diagnosticului– COVID-19?
Teste de detectare
  • Virusul în sine (izolarea virusului) – în practica de rutină nu se aplică.
  • Componenta proteică a virusului (antigen) – imunocromatografie (teste-rapide).
  • Fragmentul ARN al virusului – reacția de polimerază în lanț (PCR).
  • ARN- ul virusului – secvențierea  următoarei generații NGS).
Cele mai des sunt utilizate testele de reacție ale polimerazei în lanț (PCR).
Care sunt avantajele testelor PCR?
  • Sensibilitate înaltă.
  • Specificitate înaltă.
  • Rata acceptabilă de obținere a rezultatelor (de obicei 1-2 zile lucrătoare).
Ce influențează precizia și fiabilitatea testării PCR?
  • Perioada de prelevare a probei (testare prea devreme sau târzie)
ARN SARS-CoV-2 este detectat  în tractul respirator superior la majoritatea pacienților cu aproximativ 48 de ore înainte de debutul simptomelor și cu încă 2 săptămâni după debutul simptomelor și aproximativ 3 săptămâni în tractul respirator inferior, după care, de regulă, încetează să mai fie detectat. Uneori ARN-ul SARS-CoV-2 poate continua să fie detectat la 4-5-6 săptămâni de la debutul simptomelor (cauze posibilele - eroare în testare, reinfectare, reactivare).
  • Locul prelevării probei
Trebuie remarcat faptul că cel mai adesea ARN SARS-CoV-2 se găsește în lavajul din arborele bronhoalveolare (93%), mai rar în spută (72%), în nas (63%) și în materiile fecale (57%) și mult mai rar în faringe (32%) din cazuri.
  • Calitatea colectării biomaterialului
Depinde de tehnologie și consumabile utilizate. Tehnica slabă de către personalul medical sau de a obține o probă  de către pacient însuși este motivul cel mai frecvent pentru eficiența scăzută a cercetării.
  • Caracteristicile sistemului de testare utilizat (reagenți)
Ccaracteristicile importante sunt: numărul de ARN-uri specifice detectate (> 2) și pragul de detecție (<500 copii de ARN / ml).

Oricare dintre factorii și combinațiile lor poate duce la rezultate fals negative (rezultatul testului negativ în prezența virusului).

Dacă rezultatul testului PCR este pozitiv?
  • Detectarea (pozitivitatea) ARN SARS-CoV-2 în probă este considerată a fi un criteriu suficient pentru stabilirea unui diagnostic de COVID-19 în contextul istoricului medical și al istoricului epidemiologic al pacientului.
Notă:
  • Detectarea ARN-ului SARS-CoV-2 poate să nu fie un criteriu pentru viabilitatea virusului sau că, SARS-CoV-2 este cauza apariției simptomelor clinice (pentru a exclude o infecție concomitentă, este util să se efectueze diagnosticarea PCR a gripei și a virusului sincițial respirator).
  • În primul rând, în dinamică, pozitivitatea scade și dispare la probele din nazofaringe, apoi la probele din spută și, în sfârșit, obținute din probele lavajului bronheoalveolar.
  • Încărcarea virală la pacienții asimptomatici este similară cu cea la pacienții simptomatici, ceea ce indică o potențială transmitere a pacienților asimptomatici sau minim simptomatici.
  • Virusul încetează să mai fie detectat prin metode virusologice la aproximativ 10 zile de la debutul simptomelor.
Dacă rezultatul testului PCR este negativ?
  • Absența (negativitatea) ARN SARS-CoV-2 în probă este considerată un criteriu suficient pentru a exclude infecția SARS-CoV-2 actuală în contextul istoricului medical și al istoricului epidemiologic al pacientului.
Notă:
  • Rezultat negativ al testului indică faptul că ARN-ul SARS-CoV-2 nu a fost prezent în proba de test peste limita de detectare și / sau inhibitori de PCR au fost prezenți în probă.
  • Un rezultat negativ nu poate exclude complet infecția cu SARS-CoV-2 19, mai ales dacă a fost investigat biomaterialul obținut din nazofaringe și / sau într-un stadiu incipient al bolii.
  • Dacă rezultatul este negativ, dar suspiciunea de COVID-19 rămâne, este necesar să se efectueze un nou test PCR din același biomaterial sau alt biomaterial, dar cu o sarcină virală potențial mai mare (spută sau tampoane obținute prin lavaj bronheoalveolar) și / sau determinare serologică a anticorpilor, în primul rând IgM.
Cu ce scop se aplică testarea anticorpilor la COVID-19?
  • Evaluarea răspunsului imun adaptativ al organismului la SARS-CoV-2 pentru a susține luarea empirică a deciziilor clinice în diagnosticul și managementul pacienților cu COVID-19.
  • Identificarea persoanelor asimptomatice sau a pacienților cu rezultate negative ale PCR cauzate unei încărcături virale foarte scăzute și incapacității de a realiza cercetarea biomaterial din tractul respirator inferior.
  • Evaluarea stării imunologice (imunitate) la pacienții care au suportat această boală. După dezvoltarea unui vaccin împotriva COVID-19, persoanele care nu au imunitate la SARS-CoV-2, conform unui studiu privind anticorpii, pot deveni o prioritate pentru vaccinare.
  • Evaluarea epidemiologică a nivelului de infectare a populației SARS-CoV-2.
  • Identificarea / screening-ul potențialilor donatori de plasmă extrem de reactivi (reconvalescenți COVID-19).
Ar trebui să utilizați teste la anticorpi pentru a stabili un diagnostic COVID-19?
  • Testele anticorpilor nu sunt destinate să confirme sau să excludă o infecție actuală cu SARS-CoV-2.
Ce teste trebuie utilizate pentru a evalua un răspuns imun adaptativ la SARS-CoV-2?
  • Testele care detectează anticorpi (imunoglobuline) din clasele IgM, IgG, IgA împotriva antigenelor virusului.
Ce metode sunt utilizate pentru a detecta anticorpi împotriva SARS-CoV-2?
  • Analiza imunocromatografică (implementată în sisteme de testare rapidă, multe dintre ele având caracteristici de diagnostic scăzute (sau discutabile).
  • Analiza chemiluminescentă (necesită echipamente analitice speciale, fiabilitate și costuri ridicate).
  • Analiza imunoenzimelor (fiabilitate ridicată, cost rezonabil).
  • Cel mai adesea, sunt utilizate teste bazate pe testul imunoenzimatic (ELISA).
Care pot fi rezultatele unui test serologic pentru anticorpi?
  • Pozitiv (reactiv), negativ (non-reactiv), valoare limitrofă*.
*Valoare limitrofă, care nu permite de a atribui veridic (сu o probabilitate > 95%) un rezultat pozitiv sau negativ. Se recomandă testare de laborator repetată peste 10-14 zile.

Dacă rezultatul testului la anticorpi IgG este pozitiv?
  • Infecție anterioară sau continuă.
Notă:
  • Pentru a atinge niveluri de IgG detectabile, este necesară o medie de 10-14 zile după debutul simptomelor (în funcție de caracteristicile individuale, încărcătura virală etc.).
  • Concentrația maximă a anticorpilor este înregistrată la 20 de zile de la debutul simptomelor.
  • Momentul circulației IgG în sânge nu este cunoscut în prezent din motive obiective.
  • Unele persoane nu generează IgG din cauza imunosupresiei și / sau a altor cauze.
  • Relația dintre pozitivitatea IgG și imunitatea la SARS-CoV-2 nu a fost încă stabilită.
  • Sistemele de testare care utilizează antigeni N (Nucleocapsid) și S (Spike) ca fază solidă demonstrează o sensibilitate mai bună decât sistemele de testare folosind doar unul dintre antigeni.
Dacă rezultatul testului la anticorpi IgG este negativ?
  • Anticorpii IgG împotriva SARS-CoV-2 nu sunt prezenți la un nivel care poate fi detectat de sistemul de imunoanaliză.
  • Testarea este efectuată într-un timp scurt.
  • Nu este exclusă infecția, în special persoanele care au avut contact cu alte persoane SARS-CoV-2 infectate.
Dacă rezultatul testului la anticorpi IgG este la pragul limită?
  • Anticorpii IgG împotriva SARS-CoV-2 sunt prezenți sau aproape de pragul limită de detecție de către sistemul pentru imunoanaliză.
  • Testarea repetată peste 1-2 săptămâni.
Dacă rezultatul testului la anticorpii IgM și / sau IgA este pozitiv?
  • Replicarea activă (reproducerea) virusului la momentul actual.
Notă:
  • Pentru a atinge niveluri detectabile de IgM / A, este necesară o medie de 3-6 zile după debutul simptomelor (în funcție de caracteristicile individuale, încărcătura virală etc.).
  • Concentrația maximă a anticorpilor este înregistrată peste 5-12 de zile de la debutul simptomelor.
  • Timpul de circulație IgM/A în sânge este de aproximativ 3 săptămâni, nefiind complet stabilit.
  • Unele persoane nu generează IgM/A din cauza imunosupresiei și / sau a altor cauze.
  • Cea mai  bună sensibilitate o demonstrează sistemul de testare , în primul rând, determinând anticorpii A și M total și, în al doilea rând, folosind antigeni N (Nucleocapsid) și S (Spike) ca fază solidă, decât sistemele de testare folosind doar unul dintre antigeni.
  • Sensibilitatea de detectare a IgM este mai mare decât sensibilitatea de detecție a ARN SARS-CoV-2 peste 5-6 zile de la debutul simptomelor.
Dacă rezultatul testului la anticorpii IgM și / sau IgA este negativ?
  • Anticorpii IgM/A împotriva SARS-CoV-2 nu sunt prezenți la un nivel care poate fi detectat de sistemul de imunoanaliză.
  • Testarea este efectuată într-un timp scurt.
  • Nu este exclusă infecția, în special persoanele care au avut contact cu alte persoane SARS-CoV-2 infectate.
Dacă rezultatul testului la anticorpi IgM și/sau IgA este la pragul limită?
  • Anticorpii IgM și/sau IgA împotriva SARS-CoV-2 sunt prezenți sau aproape de pragul limită de detecție de către sistemul pentru imunoanaliză.
  • Testarea repetată peste 1-2 săptămâni.
Există reactivitate încrucișată între anticorpi împotriva SARS-CoV-2 și alte coronavirusuri?
  • Analiza panelurilor de probe de sânge prelevate în 2010, 2017 și 2019 arată că, în cazuri foarte rare (<1%), rezultatele fals-pozitive sunt posibile datorită reacțiilor încrucișate cu tulpini endemice (sezoniere) de coronavirus (HKU1, NL63, OC43, 229E).
Se formează imunitate la pacienții ce au suportat infecția?
  • Nu se știe, până în prezent nu există un răspuns clar la această întrebare.
  • În ceea ce privește SARS-CoV, s-a demonstrat că IgG oferă o imunitate de până la 2 ani.
Cum se interpretează corect rezultatele testelor moleculare și serologice?
  • Utilizarea combinată a metodelor de diagnostic molecular și serologic îmbunătățește semnificativ diagnosticul. Rezultatele trebuie interpretate întotdeauna în contextul istoricului medical și al istoricului epidemiologic al pacientului.
 
Rezultatele testelorRaportul de laborator
ARNIgMIgG 
+ Etapa timpurie (inițială) a infecției.
++ Faza activă a infecției.
+++ Faza activă a infecției și formarea imunității adaptive.
++ Etapa târzie a infecției.
+ Etapa timpurie a infecției. Este posibil rezultatul fals-negativ al PCR.
+ РReconvalescența.
++ Faza activă a infecției. Este posibil rezultatul fals-negativ al PCR.
 
 
А.Мereuța

Cum să interpretăm corect rezultatele testelor pentru COVID-19 - Antetul sit-ului

keymeta

,keymeta

descmeta

descmeta