Как правильно интерпретировать результаты тестов на COVID-19
Текущая эпидемия вызвала особый интерес ученых, врачей и самих пациентов к лабораторным исследованиям новой инфекции. По понятным причинам, именно специалистам лабораторной медицины адресуются большинство вопросов, главными из которых являются – точность и достоверность, интерпретация и прогностическая ценность тестов на COVID-19.
В связи с большим числом подобных запросов, поступающих от врачей, Alfa Diagnostica на основе анализа актуальных мировых данных подготовила собственный обзор в виде вопросов и ответов, а именно: как правильно использовать и интерпретировать результаты тестов для диагностики COVID-19.
COVID-19
Тесты, выявляющие
Какие преимущества у ПЦР-тестов?
Любой из факторов и их комбинаций может привести к получению ложноотрицательных результатов (отрицательный результат теста при наличии вируса).
Если результат ПЦР-теста положительный?
Какими могут быть результаты серологического исследования на антитела?
В связи с большим числом подобных запросов, поступающих от врачей, Alfa Diagnostica на основе анализа актуальных мировых данных подготовила собственный обзор в виде вопросов и ответов, а именно: как правильно использовать и интерпретировать результаты тестов для диагностики COVID-19.
COVID-19
- COronaVIrus Disease или болезнь, вызванная коронавирусом SARS-CoV-2.
Тесты, выявляющие
- Сам вирус (изоляция вируса) – в рутинной практике не применяются.
- Белковый компонент вируса (антиген) – иммунохроматография (рапид-тесты).
- Фрагмент РНК вируса – полимеразная цепная реакция (ПЦР).
- РНК вируса – секвенирование следующего поколения (NGS).
Какие преимущества у ПЦР-тестов?
- Высокая чувствительность.
- Высокая специфичность.
- Приемлемая скорость получения результатов (как правило, 1-2 рабочих дня).
- Сроки получения пробы (слишком раннее или позднее тестирование)
- Место взятия пробы
- Качество забора биоматериала
- Характеристики используемой тест-системы (реагентов)
Любой из факторов и их комбинаций может привести к получению ложноотрицательных результатов (отрицательный результат теста при наличии вируса).
Если результат ПЦР-теста положительный?
- Обнаружение (позитивность) РНК SARS-CoV-2 в пробе считается достаточным критерием для установления диагноза COVID-19 в контексте истории болезни и данных эпидемиологического анамнеза пациента.
- Обнаружение РНК SARS-CoV-2 может не являться критерием жизнеспособности вируса или что, именно SARS-CoV-2 является причиной появления клинических симптомов (с целью исключения сопутствующей инфекции полезно провести ПЦР-диагностику вирусных инфекций - гриппа и респираторно-синцитиального вируса).
- В-первую очередь, в динамике, позитивность снижается и исчезает в пробах из носоглотки, затем в пробах из мокроты и в последнюю очередь, из смывов, полученных после бронхоальвеолярного лаважа.
- Вирусная нагрузка у бессимптомных пациентов, аналогична таковой у пациентов с симптомами, что свидетельствует о потенциальной передаче бессимптомных или минимально симптомных пациентов.
- Вирус перестает обнаруживаться вирусологическими методами приблизительно через 10 дней после появления симптомов.
- Отсутствие (негативность) РНК SARS-CoV-2 в пробе считается достаточным критерием для исключения текущей инфекции SARS-CoV-2 в контексте истории болезни и данных эпидемиологического анамнеза пациента.
- Отрицательный результат теста указывает, что РНК SARS-CoV-2 не присутствовала в исследуемой пробе выше предела обнаружения и/или в пробе присутствовали ингибиторы ПЦР.
- Отрицательный результат не может полностью исключить инфицирование SARS-CoV-2 19, особенно, если исследовался биоматериал, полученный из носоглотки и/или на ранней стадии заболевания.
- При отрицательном результате, но при сохранении подозрения на COVID-19, необходимо выполнить новый ПЦР-тест из того же биоматериала или другого биоматериала, но с потенциально более высокой вирусной нагрузкой (мокроты или смывов, полученных путем бронхоальвеолярного лаважа) и/или серологическое определение антител, в первую очередь, IgM.
- Оценка адаптивного иммунного ответа организма на SARS-CoV-2 для эмпирической поддержки принятия клинических решений в диагностике и ведении пациентов с COVID-19.
- Выявление бессимптомных лиц или пациентов с отрицательными результатами ПЦР, обусловленных очень низкой вирусной нагрузкой и невозможностью провести исследование биоматериала из нижних дыхательных путей.
- Оценка иммунологического статуса (иммунитета) у пациентов, перенесших это заболевание. После разработки вакцины против COVID-19 приоритетными для вакцинации могут стать лица, у которых, по данным исследования антител, отсутствует иммунитет к SARS-CoV-2.
- Эпидемиологическая оценка уровня инфицированности популяции SARS-CoV-2.
- Выявление/скрининг потенциальных высокореактивных доноров плазмы (COVID-19 рековалесцентов).
- Тесты на антитела не предназначены для подтверждения или исключения текущей инфекции SARS-CoV-2.
- Иммунохроматографический анализ (реализован в рапид-тест-системах, многие из которых обладают невысокими (или сомнительными) диагностическими характеристиками.
- Хемилюминисцентный анализ (требуется специальное аналитическое оборудование, высокие достоверность и стоимость).
- Иммуноферментный анализ (высокая достоверность, приемлемая стоимость).
Какими могут быть результаты серологического исследования на антитела?
- Положительными (реактивными), отрицательными (нереактивными), пограничными (двусмысленными).
- Предшествующее или продолжающееся инфицирование.
- Для достижения обнаруживаемых уровней IgG требуется, в среднем, 10-14 дней после появления симптомов (зависит от индивидуальных особенностей, вирусной нагрузки и т.п.).
- Пиковая концентрация антител регистрируется через 20 дней после появления симптомов.
- Сроки циркуляции IgG в крови сегодня точно не известны по объективным причинам.
- Некоторые лица не генерируют IgG вследствие иммуносупрессии и/или других причин.
- Связь между позитивностью IgG и иммунитетом к SARS-CoV-2 еще не установлена.
- Лучшую чувствительность демонстрируют тест-системы, использующие в качестве твердой фазы антигены N (Nucleocapsid) и S (Spike), чем тест-системы, использующие только один из антигенов.
- Антитела IgG к SARS-CoV-2 не присутствует на уровне, который можно обнаружить с помощью системы для иммуноанализа.
- Тестирование проведено в слишком ранние сроки.
- Не исключается инфицирование, особенно лиц, имевших контакты с инфицированными SARS-CoV-2.
- Антитела IgG к SARS-CoV-2 присутствуют на уровне или близко к порогу предела обнаружения системой для иммуноанализа.
- Повторное тестирование через 1-2 недели.
- Активная репликация (размножение) вируса в текущий момент времени.
- Для достижения обнаруживаемых уровней IgM/A требуется, в среднем, 3-6 дней после появления симптомов (зависит от индивидуальных особенностей, вирусной нагрузки и т.п.).
- Пиковая концентрация антител регистрируется через 5-12 дней после появления симптомов.
- Сроки циркуляции IgM/A в крови составляют приблизительно 3 недели, окончательно не установлены.
- Некоторые лица не генерируют IgM/A вследствие иммуносупрессии и/или других причин.
- Лучшую чувствительность демонстрируют тест-системы, во-первых, определяющие суммарные антитела A и M, во-вторых, использующие в качестве твердой фазы антигены N (Nucleocapsid) и S (Spike), чем тест-системы, использующие только один из антигенов.
- Чувствительность определения IgM выше чувствительности определения РНК SARS-CoV-2 через 5-6 дней после появления симптомов.
- Антитела IgM/A к SARS-CoV-2 не присутствуют на уровне, который можно обнаружить с помощью тест-системы для иммуноанализа.
- Тестирование проведено в слишком ранние сроки.
- Не исключается инфицирование, особенно лиц, имевших контакты с инфицированными SARS-CoV-2.
- Антитела IgM и/или IgA к SARS-CoV-2 присутствуют на уровне или близко к порогу предела обнаружения системой для иммуноанализа.
- Повторное тестирование через 1-2 недели.
- Анализ панелей образцов крови, сданных в 2010, 2017 и 2019 годах показывает, что в очень редких случаях (<1%), возможны ложноположительные результаты вследствие перекрестных реакций с эндемичными (сезонными) штаммами коронавируса (HKU1, NL63, OC43, 229E).
- Неизвестно, на сегодняшний день однозначного ответа на этот вопрос не существует.
- В отношении SARS-CoV было показано, что IgG обеспечивают иммунитет на срок до 2 лет.
- Сочетанное использование методов молекулярной и серологической диагностики существенно улучшает диагностику.
- Интерпретировать результаты следует всегда в контексте истории болезни и данных эпидемиологического анамнеза пациента.
| Результаты тестов | Лабораторное заключение | ||
| РНК | IgM | IgG | |
| + | – | – | Ранняя (начальная) стадия инфекции. |
| + | + | – | Активная фаза инфекции. |
| + | + | + | Активная фаза инфекции и формирование адаптивного иммунитета. |
| + | – | + | Поздняя стадия инфекции. |
| – | + | – | Ранняя стадия инфекции. Возможен ложноотрицательный результат ПЦР. |
| – | – | + | Рековалесценция. |
| – | + | + | Активная фаза инфекции. Возможен ложноотрицательный результат ПЦР. |
Рекомендации подготовлены А.Мереуца